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PicoGreen荧光法定量生物制品DNA残留在Modulus单管型多功能检测仪上的应用

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简介:

        疫苗是现代疾病预防中常用的控制方式。如今许多疫苗是细胞培养疫苗,比如重组乙肝疫苗、狂犬病疫苗等大多数疫苗都采用细胞培养的方法生产。其中,疫苗的纯化是关键问题,我们需要尽可能的去除宿主细胞DNA和宿主蛋白。假若宿主细胞的DNA和蛋白同疫苗一起注入人体将会产生不可预料的后果。
        常规的DNA含量的检测方法是在 260nm(A260)处测其吸光值。这种方法的主要缺点是核苷酸、单链核酸和蛋白质对信号的影响很大,并且还会受到核酸制备过程中污染物的干扰,无法区分 DNA和 RNA,而且这种方法不灵敏( 5μg/mLdsDNA溶液 A260=0.1)。
        在2010年版《中国药典》的征求意见稿中,针对生物制品的DNA残留检测,药典提供了两种检测方法。其中的PicoGreen定量检测方法简单、方便,被多家生物制品厂所选择,成为生物制品残留DNA检测的标准。
        ModulusTM单管型多功能检测仪是Turner Biosystems公司的一款产品,具有发光、荧光和吸收光检测功能。使用ModulusTM单管型多功能检测仪,可以通过PicoGreen来精确定量dsDNA。如果使用微量适配器,可以将检测体积减少到100ul以下,节约样品的同时也节约了染料的成本。